细胞提取物中同型半胱氨酸的酶促测定。
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傅特福，迪萨尔沃M，施尔奇V
细胞提取物中同型半胱氨酸的酶促测定。
《生物化学杂志》2001年3月;290(2):359-65。
- PubMed ID
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11237340 (PubMed视图］
- 摘要
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测定细胞和血清中的同型半胱氨酸水平很重要，因为高同型半胱氨酸是心血管疾病的危险因素。目前使用的同型半胱氨酸分析方法要么耗时，要么依赖昂贵的设备。本研究描述的是一种酶促测定方法，仅使用分光光度计在不到30分钟的时间内测定多个样品中5至50 pmol的同型半胱氨酸水平。该方法的重复性与目前使用的其他方法一致。第二种方法灵敏度提高了5倍，采用酶催化的溶剂交换beplayapp甘氨酸上的质子，这需要一个闪烁计数器。分光光度法和辐射法都是以蛋氨酸合酶将5-甲基四氢叶酸转化为四氢叶酸为基础的。四氢叶酸与样品中的同型半胱氨酸形成化学计量量。在分光光度法中，四氢叶酸在催化水平上被三种酶使用，形成从NADP(+)生成NADPH的代谢循环。在辐射测定中，甘氨酸的pro 2S质子与溶剂的酶交换需要四氢叶酸。l -半胱氨酸的水平比这些测定中使用的高半胱氨酸水平高出30多倍，没有产生任何可测量的反应。