环羟基化[o-3H]甲氧氯作为肝微粒体CYP2B活性的探针:体内CYP2B测定的潜力。

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应力器DM, Dehal SS, Kupfer D

环羟基化[o-3H]甲氧氯作为肝微粒体CYP2B活性的探针:体内CYP2B测定的潜力。

中国生物化学。1996年1月1日;233(1):100-7。

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8789153 (PubMed视图

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摘要

描述了一种选择性诱导CYP2B活性的体外辐射测定方法。该方法是基于在NADPH存在的情况下，肝微粒体对[o-3H]甲氧基氯的o环羟基化过程中3H2O释放的定量。通过简单的木炭提取和过滤去除99.9%的母化合物和有机代谢物，分离出3H2O。在环羟基化过程中，没有证据表明NIH发生了变化，并且很少或没有同位素效应。CYP2B的选择性是用大鼠和小鼠的肝微粒体制备的，用不同CYP亚型的诱导剂处理。苯巴比妥治疗雄性大鼠的肝微粒体中[o-3H]甲氧氯环羟基化水平比对照值提高11.4倍。在小鼠中，苯巴比妥治疗使肝微粒体环羟基化升高7.1倍。雄性大鼠经氯贝特、3-甲基胆蒽或β -萘黄酮处理，雌性大鼠经吡啶处理，均未升高肝脏微体环羟化酶活性，表明CYP4A、1A和2E1不支持该反应。在雌性大鼠中，地塞米松和孕烯醇酮-16 α -羰腈处理分别将环羟基化提高到5.5倍和3.2倍，这种活性可能归因于这些动物中CYP2B的诱导。用单特异性抗cyp2b单克隆抗体(Mab)孵育苯巴比妥处理的雄性肝脏微粒体，可抑制环羟化酶活性高达86%，表明主要是cyp2b介导的催化作用。 An 86% inhibition by these Mabs was also observed using liver microsomes from male mice treated with phenobarbital, indicating the assay is not limited to rats. The CYP2B mechanism-based inhibitor orphenadrine caused a 76% decline in activity, providing further evidence for CYP2B involvement. Unlike other CYP2B-selective assays, this method may be readily adapted to in vivo studies, by measuring urinary excretion of 3H2O as an indication of total body CYP2B activity.

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药物酶

药物	酶	种类	生物	药理作用	行动
Orphenadrine	细胞色素P450 2B6	蛋白质	人类	未知的	抑制剂	细节