瞬时表达oatp有机阴离子转运蛋白在哺乳动物细胞:识别候选基质。
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陆Kanai N, R,保Y, Wolkoff啊,舒斯特尔六世
瞬时表达oatp有机阴离子转运蛋白在哺乳动物细胞:识别候选基质。
270年2月杂志。1996;(2 Pt): F319-25。
- PubMed ID
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8779893 (在PubMed]
- 文摘
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互补脱氧核糖核酸的鼠肝有机anion-transporting多肽“oatp”已被证明编码运输bromosulfophthalein (BSP)和胆汁盐在非洲爪蟾蜍卵母细胞(e . Jacquemin b . Hagenbuch b·斯蒂格·a·w·Wolkoff和p•j•迈耶。Proc。国家的。学会科学。美国91:133 - 137,1994)。因为肾脏oatp mRNA表达强烈,我们试图确定肾oatp可能发挥作用在已知的分泌的多种有机阴离子的肾脏。我们短暂表达了长篇oatp cDNA、克隆pSPORT,使用重组痘苗病毒vtf7-3海拉细胞单层膜。我们测试了一组候选基质的有机阴离子决定与示踪BSP争夺运输的能力。海拉细胞单层转染oatp cDNA运送示踪BSP和牛磺胆酸盐利率大大高于单层膜与控制质粒转染。因此获得了良好的表达与vaccinia-HeLa系统使用标准质粒克隆载体。BSP传输变化的函数中白蛋白离子条件,pH值的类似于非洲爪蟾蜍卵母细胞。 Several organic anions known to be secreted by the classic secretory pathway, including p-aminohippurate (PAH), phenol red, and indigo carmine (10 microM) failed to inhibit oatp-mediated BSP transport. Direct testing using tracers revealed no oatp-mediated transport of sulfate, urate, PAH, several eicosanoids, or unconjugated or conjugated bilirubin. On the other hand, BSP transport was inhibited by approximately 50% by 10 microM corticosterone sulfate, spironolactone, and several other steroids. We conclude that the functional properties of oatp expressed in the HeLa cell/vaccinia transient expression system are comparable to those following expression in Xenopus oocytes and that steroids are likely to represent high-affinity endogenous oatp substrates. The latter hypothesis is addressed in greater detail in a companion paper.
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- 药物转运蛋白
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