噬菌体展示的选择有效的glutamine-donor底物肽转谷氨酰胺酶2。

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Keresztessy Z, Csosz E, Harsfalvi J, K Csomos,灰色J, Lightowlers RN, Lakey JH, Balajthy Z, Fesus L

噬菌体展示的选择有效的glutamine-donor底物肽转谷氨酰胺酶2。

蛋白质科学。2006年11月,15 (11):2466 - 80。

PubMed ID

17075129 (在PubMed

]

文摘

理解转谷氨酰胺酶的底物特异性和识别的自然目标2 (TG2),无处不在的多功能交联酶,形成isopeptide债券之间的蛋白质谷氨酰胺和赖氨酸残留,说明它的生理作用是至关重要的。作为小说的特殊性分析,我们采用噬菌体展示技术从随机选择glutamine-donor基质heptapeptide图书馆通过绑定到重组TG2合成amine-donor衬底和洗脱。26 Gln-containing序列从第二和第三,biopan轮受到了TG2-mediated整合5 - (biotinamido) penthylamine和肽GQQQTPY GLQQASV, WQTPMNS最高效的方式修改。谷氨酰胺的共识是建立pQX (P T, S) l,这是符合确定基质中列出TRANSDAB数据库。数据库搜索显示包含几个蛋白多肽类似phage-selected序列,和多为n端结构域SWI1 / SNF1-related染色质重塑蛋白被选作详细的分析。MALDI / TOF和串联质量spectrometry-based研究领域的一部分,代表SGYGQQGQTPYYNQQSPHPQQQQPPYS (SnQ1)透露,Q (6), Q Q(8),(22)被TG2修改。动力学参数的SnQ1 transamidation (K (M) (app) = 250 microM, K (cat) = 18.3秒(1),和K (cat) / K (M) (app) = 73200)把它归类为一个有效TG2衬底。圆二色性光谱表明SnQ1无规卷曲构象,支持可访问性的完整的蛋白质。加在一起,在这里,我们报告一个小说利用噬菌体展示技术与转谷氨酰胺酶研究的巨大潜力。

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药物酶

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