一个普遍的人类的表达方法和兔子的细胞色素p450 2 c在大肠杆菌亚科。
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理查森TH,荣格F,格里芬KJ,西风M, Raucy杰,Kemper B, Bornheim LM,哈西特C, Omiecinski CJ,约翰逊EF
一个普遍的人类的表达方法和兔子的细胞色素p450 2 c在大肠杆菌亚科。
拱生物化学Biophys。1995年10月20日,323 (1):87 - 96。doi: 10.1006 / abbi.1995.0013。
- PubMed ID
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7487078 (在PubMed]
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人类细胞色素P450 2 c8, 2 c9, 2使用c18和2 c19和兔细胞色素P450 2 c1, c2, 2 c4、c5 2和2 c16在大肠杆菌表达从各自的互补嵌合酶的氨基端膜锚序列的一部分替换为修改后的序列来自P450 17。2 c1和c2删除多余的3 '非翻译序列允许结构的成功表现在其面前都是徒劳的。表达不同的水平从180年到1500 nmol / l的文化和增加delta-aminolevulinic酸培养基增加了这些酶的光谱探测P450数2 - 10倍。修改后的人类的催化性质2 c P450在大肠杆菌表达数据整合与此前发布的几个标记底物包括P450 2 c19 (S)美芬妥因甲苯磺丁脲和四氢大麻醇(THC) P450 2 c9、c8和紫杉醇P450 2。有趣的是,P450 2 c19催化21-hydroxylation孕激素,在较小程度上,催化16 alpha-hydroxyprogesterone的形成。兔子酶P450 2 c16催化形成17α-和16 alpha-hydroxyprogesterone除了21-hydroxylation。P450 2 c19也催化甲苯磺丁脲的methylhydroxylation和THC的7-hydroxylation率接近或大于P450 2 c9。这项工作已经确定了所需的重要因素2 c亚p450的高层表达大肠杆菌。这些酶的可用性将促进详细动力学测量已知的和尚未确定基质。
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