人类肾脏二胺氧化酶:不同的表达、纯化和表征。

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爱尔摩BO, JA, Dooley DM

人类肾脏二胺氧化酶:不同的表达、纯化和表征。

J Inorg化学杂志。2002年6月,7 (6):565 - 79。Epub 2002年2月13日。

PubMed ID
12072962 (在PubMed
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人类肾脏二胺氧化酶作为分泌酶过表达的金属硫蛋白启动子的控制下果蝇S2细胞培养。这是第一个不等的超表达和纯化的催化地活跃,重组哺乳动物铜的胺氧化酶。快速、高效净化协议使用肝素亲和层析,羟磷灰石,和凝胶过滤媒体允许大量的重组酶的复苏,这是判断大于同质98% SDS /页面。大量高纯度的可用性酶使它现在可以研究出光谱,机械的功能和结构属性的人类酶在分子水平上。可见吸收、圆二色性、电子顺磁共振和共振喇曼光谱的结果。包含代数余子式的重组酶2,4,5-trihydroxyphenylalaninequinone和铜在化学计量学的为1.1和1.5摩尔每摩尔,分别。此外,紧密地绑定和化学计量钙离子被确定并提出占据第二metal-binding网站。重组蛋白的表观分子量,由分析超速离心法,建议按重量20 - 26%糖基化。详细的动力学研究表明首选基质(k (cat) / k (M))的人类二胺氧化酶,在秩序,组胺,1-methylhistamine,腐胺,k (M)值为2.8,3.4,和20 microM分别。这些结果,展示了衬底对组胺和1-methylhistamine的偏好,意外得到可用的文学。 The pH dependence of k(cat) for putrescine oxidation gives two apparent p K(a) values at 6.0 and 8.2. Tissue-specific expression of the human diamine oxidase gene was investigated using an mRNA array. The relevance of this work to earlier work and the suggested physiological roles of the human enzyme are discussed.

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药物靶点
药物 目标 生物 药理作用 行动
Amiloride-sensitive胺氧化酶(铜) 蛋白质 人类
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