人肝胆汁酸结合蛋白cDNA的克隆与表达。单体还原酶基因家族的一员
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Stolz A, Hammond L, Lou H, Takikawa H, Ronk M, Shively JE
人肝胆汁酸结合蛋白cDNA的克隆与表达。单体还原酶基因家族的一员
中华生物化学杂志1993年5月15日;268(14):10448-57。
- PubMed ID
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8486699 (PubMed视图］
- 摘要
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在人类肝脏中，我们之前发现了一种二氢二醇脱氢酶活性亚型，它表达了高亲和力胆汁酸结合(HBAB)，而对胆汁酸的3 α -羟基甾体脱氢酶(3 α - hsd)活性极低。该蛋白可协助胆汁酸在细胞内从窦极到管极的快速运输。我们现在报告的cDNA克隆和细菌表达的这种新型，多功能蛋白。利用大鼠肝胆汁酸结合物cDNA探针从HepG2 lambda GT11文库中克隆出1252个碱基对的HBAB cDNA。细菌表达重组HBAB氧化外消旋反式二氢二醇苯(0.455 mumol NADPH/mg/min)，对胆汁酸的3 α - hsd活性最低(< 0.003 mumol NADPH/mg/min)。用双-1-苯胺-8磺酸荧光探针位移测定的石胆酸和鹅去氧胆酸解离常数高于先前报道的天然蛋白质解离常数(1微米对10 nM)。与人十氯酮还原酶、牛前列腺素F合成酶和大鼠肝c-3 α - hsd发现了显著的氨基酸序列同源性，这表明HBAB也是最近发现的单体氧化还原酶基因家族的成员。未来的研究将确定这种新型多功能蛋白在胆汁酸转运和异种生物代谢中的生理意义。