人20 α -羟基甾体脱氢酶的表征。
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张勇，杜福尔I，罗特P，卢氏V
人20 α -羟基甾体脱氢酶的表征。
分子内分泌杂志2000 10月;25(2):221-8。
- PubMed ID
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11013348 (PubMed视图］
- 摘要
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已有研究表明，20 α -羟基甾体脱氢酶(20 α - hsd)是小鼠t细胞分化标志物。在人类中，这种酶通常与1型和2型17 β - hsd有关，它们属于短链醇脱氢酶家族，而大鼠、兔子、猪和牛的20 α - hsd是醛酮还原酶超家族的成员，该家族还包括3 α - hsd家族。在本研究中，我们报道了从人皮肤cDNA文库克隆的cDNA，该cDNA显示，转染到人胚胎肾(HEK-293)细胞后，具有高的20 α - hsd活性，但可忽略的3 α -和17 β -羟基类固醇脱氢酶活性。人类20alpha- hsd与其他相关20alpha-和3alpha-HSDs的氨基酸序列比较表明，人类20alpha- hsd与兔、大鼠和牛20alpha- hsds的氨基酸序列同源性分别为79.9、68.7和52.3%，而与人类3型、1型和大鼠3alpha-HSDs的氨基酸序列同源性分别为97%、84%和65%。相比之下，这种酶与1型和2型人类17beta-HSDs的同源性分别为15.2%和15.0%。DNA分析预测该蛋白含有323个氨基酸，计算分子量为36 767 Da。在完整转染的细胞中，人20 α - hsd优先催化孕酮还原为20 α -羟孕酮，K(m)值为0.6微米，反向反应(氧化)可以忽略不计。在细胞细胞质制剂中，该酶可以同时使用NADPH和NADH作为辅因子，但NADPH的K(m)值低4倍，是首选。我们检测了20 α - hsd mRNA在肝脏、前列腺、睾丸、肾上腺、大脑、子宫和乳腺组织以及人角质形成细胞(HaCaT)中的表达。目前的研究清楚地表明，真正的人类20 α - hsd与来自其他物种的20 α - hsd一样，属于醛酮还原酶家族。