人类kappa阿片受体的糖基化增强了其稳定性，但减缓了其沿生物合成途径的运输。
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李建刚，陈晨，刘晨
人类kappa阿片受体的糖基化增强了其稳定性，但减缓了其沿生物合成途径的运输。
生物化学。2007 9月25日;46(38):10960-70。Epub 2007 8月21日。
- PubMed ID
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17711303 (PubMed视图］
- 摘要
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我们检测了CHO细胞中FLAG-hKOR的糖基化，并确定了其功能意义。FLAG-hKOR经免疫印迹分析为宽而弥散的55-kDa条带和不太弥散的45-kDa条带，表明该受体是糖基化的。内糖苷酶H将45-kDa条带裂解至约38 kDa，但未改变55-kDa条带，表明45-kDa条带被高甘露糖或杂化型聚糖n -糖基化。肽- n -糖苷酶F消化溶解的hKOR或用囊霉素孵育细胞，得到43 kDa和38 kDa两个物种，表明43-kDa带是o -糖基化的。FLAG-hKOR被神经氨酸酶和o -糖苷酶还原为较低的Mr条带，表明hKOR含有o -链聚糖。将Asn25或Asn39突变为n端结构域的Gln, Mr降低约5 kDa，表明这两个残基都发生了糖基化。双突变体hKOR-N25/39Q被解析为43-kDa(成熟型)和38-kDa(中间型)条带。瞬时表达时，hKOR-N25/39Q的表达量低于野生型。在稳定表达hKOR-N25/39Q的CHO细胞中，脉冲追踪实验显示，中间型和成熟型的周转率常数(ke)约为野生型的3倍。此外，43-kDa形态的hKOR-N25/39Q成熟速率常数(ka)是野生型成熟形态的6倍。 The hKOR-N25/39Q mutant showed increased agonist-induced receptor phosphorylation, desensitization, internalization, and downregulation, without changing ligand binding affinity or receptor-G protein coupling. Thus, N-glycosylation of the hKOR plays important roles in stability and trafficking along the biosynthesis pathway of the receptor protein as well as agonist-induced receptor regulation.