智人犬尿氨酸酶的晶体结构。
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利马,克里斯托夫洛夫R, Momany C,菲利普斯RS
智人犬尿氨酸酶的晶体结构。
生物化学。2007年3月13日,46 (10):2735 - 44。Epub 2007年2月15日。
- PubMed ID
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17300176 (在PubMed]
- 文摘
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犬尿氨酸酶是催化地多样化的一个大家庭的成员,但结构同源5 '磷酸吡哆醛(PLP)相关的酶称为天冬氨酸转氨酶总科或alpha-family。智人和其他真核本构优先犬尿氨酸酶催化的水解乳沟3-hydroxy-l-kynurenine生产3-hydroxyanthranilate和丙氨酸,而l-kynurenine许多原核诱导犬尿氨酸酶的底物。克隆人类酶的氨基端hexahistidine标签,从细菌表达系统表达,纯化使用镍金属离子亲和色谱法。重组酶的动力学特征揭示了经典Michaelis-Menten行为,28.3 + / - 1.9公里的microM和特定的活动1.75 micromol最低为1 mg-1 3-hydroxy-dl-kynurenine。2.0晶体衍射的重组犬尿氨酸酶,获得的原子结构PLP-bound全酶是由分子替换使用荧光假犬尿氨酸酶结构(PDB项1 qz9)分阶段模型。结构叠加与p .荧光犬尿氨酸酶透露,这两个结构类似于“开放”和“封闭”天冬氨酸转氨酶的构象。比较说明了这些蛋白质的动态特性的参数域和揭示了一个小角色- 434类似于它的作用在其他AAT alpha-family成员。对接3-hydroxy-l-kynurenine到人类犬尿氨酸酶活性位点表明asn - 333和- 102参与衬底绑定和分子诱导和本构犬尿氨酸酶底物之间的歧视。